Trastuzumab (150kDa), insan epidermal büyüme faktörü reseptörü-2'ye (HER2) karşı yönlendirilen ve metastatik meme kanseri tedavisi gören hastalarda kullanılan bir monoklonal antikordur (mAb). Bu biyobenzer ilaçların tedavide kullanılabilmesi için biyoeşdeğerlik çalışmalarının yapılması gereklidir ve bu çalışmaların başarısı da analitik yöntemin güvenilirliğine bağlıdır. Bu çalışmada, fluoresans dedektörü (FLD) ile birleştirilmiş yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) kullanarak toplam Trastuzumab analizi için bir biyoanalitik yöntem tanımlanmıştır. Trastuzumab, protein G kolonu kullanılarak sıçan serumundan izole edildikten sonra glisinle elüe edilerek, elüent, uyarma ve emisyon dalga boylarının sırasıyla 278 ve 343 nm'ye ayarlandığı HPLC sistemine enjekte edilmiştir. Akış hızı, kolon türü hareketli faz türü ve bileşimi ve örnek hazırlama aşamasında kullanılan elüent gibi deneysel parametreler, piklerin ayrılması ve geri kazanım yüzdeleri dikkate alınarak optimize edilmiştir. Optimum koşullar altında kalibrasyon grafiği oluşturulmuş ve belirtme alt sınırı 5.3 µg/mL olarak hesaplanmıştır. Bu yöntemin farmakokinetik çalışmalar için uygulanabilirliği tartışılmıştır.