El pitayo (Stenocereus stellatus) es una cactacea nativa de Mexico, apreciada por sus frutos, los cuales tienen caracteristicas organolepticas unicas. Su propagacion es por esquejes tomados de plantas adultas, generalmente silvestres, causando deforestacion de zonas naturales. El objetivo fue definir el tipo y la dosis de citocininas asi como la concentracion de sacarosa que permita obtener mayor numero de plantas de pitayo in vitro. Se usaron semillas de frutos maduros de las cuales se obtuvieron plantulas para iniciar el incremento de plantas. Para la multiplicacion de brotes se utilizaron plantulas de 2 a 3 cm de altura divididas en secciones de 1 cm, el medio fue MS con 3 % de sacarosa; se evaluaron tres citocininas (kinetina, 6-benciladenina, y 2-isopentiladenina) en cinco concentraciones (2.2, 4.4, 8.8, 17.6 y 35.2 ¿ÊM). Para el crecimiento de brotes se uso medio MS con sacarosa (1, 2, 3, 4 y 5 %). En la aclimatacion se evaluo el efecto de la concentracion de sacarosa usada para el crecimiento de los brotes in vitro. Se observo que la concentracion de 17.6 ¿ÊM de 6-benciladenina ocasiono formacion de brotes en todos los explantes, los cuales tuvieron ocho brotes por explante. Los brotes desarrollaron la mayor altura cuando fueron cultivados en 3 y 4 % de sacarosa. En aclimatacion sobrevivieron mas del 92 % de las plantas trasplantadas a sustrato.